在進行非臨床安全性評價中，實驗動物常被用於了解靶器官（guān）毒（dú）性作用特征、劑量依賴性、與暴露量的關係（xì）以及潛在的（de）可逆性（如適（shì）用）等實驗中。所得信息將被用於（yú）估算人（rén）體試驗的（de）初始安（ān）全劑量和範（fàn）圍，並（bìng）確（què）定臨床監測潛在不良反應（yīng）的參數。而非臨（lín）床安全評價中的一個重要方麵就是檢測受試物對動物生殖係統的（de）影響，這（zhè）些（xiē）研究通常（cháng）在齧齒類動物和兔上進行。然（rán）而，對於（yú）許多生（shēng）物藥（yào）品而言，齧齒類動物（wù）和兔往往觀（guān）察不到與人類相當的藥理學活性，則需（xū）使用非（fēi）人靈（líng）長類動物（NHP）來（lái）進行測試。而對（duì）於這類（lèi）評價，需要求動物達到性成熟，那如何來證明（míng）或者確認非人靈長類動物已經達到性成熟（shú）呢？

藥物安全性（xìng）評估中最常用的NHP品係是食蟹猴（Macaca fascicularis）。食蟹猴最早生活（huó）於赤道附近，該（gāi）地區沒（méi）有明顯的夏（xià）季和冬季（jì），因此，它們一年四季都可以有活躍的的性活動。此外，自然棲息於巴西的（de）狨猴（Callithrix jacchus），偶（ǒu）爾也被用作生殖方麵（miàn）研究，但它們在預測潛在的睾丸或類（lèi）固醇激素（sù）相關內分泌效應（yīng）方麵的價值有限。而恒河猴（Macaca mulatta）很少（shǎo）用於生殖安（ān）全性研究，原因之一是其生育力具（jù）有明顯的季節性，並且生殖（zhí）功能有約（yuē）半年（nián）的時間都比較弱。因此本文將主要介紹食蟹猴的性成熟判定。

壹、雄性食蟹猴的性成熟（shú）

總體而言，食蟹（xiè）猴的（de）性成熟開始時間很難預測，並且個體差異較大。一般認為來自毛裏求斯的食（shí）蟹（xiè）猴似乎（hū）比來自（zì）亞洲的食蟹猴更早（zǎo）成熟。

雄性食蟹猴的性成熟可以通過精子生成來判定，精子生成通常發生在骨骺（hóu）閉合之前。精子（zǐ）生成的完成可（kě）以通過精液樣本中（zhōng）存（cún）在精子來證明，這也是（shì）雄（xióng）性性成熟的推薦功能參數。射精的能力和精子的存在象征著整個雄性生殖係統完全成熟。

除了通過精液樣本來判斷以外，年齡、體重或睾丸體（tǐ）積也可作為替代的判定（dìng）指標。5歲5個月且體重5.3 kg 以上的（de）動物被認為與其睾（gāo）丸（wán）成熟有90%的相關性。睾丸體積超（chāo）過10mL 也能預示性成熟。用於測定睾（gāo）丸體積的方法很重要。有研究表明，超聲測量比遊標卡尺測（cè）量更準確。此外（wài），睾丸重量在20g 以上也是睾丸成（chéng）熟度的良好指標。雄性附屬生殖器官的成熟與睾丸成熟直接相關。當睾丸功能發（fā）育完全，即產生精子和（hé）睾酮時，這些器官就發（fā）育完全。組織學（xué）上（shàng），如果在曲細精管中觀察到（dào）完整的精（jīng）子發生，並且在附睾中發現中（zhōng）等（děng）或大量的精子（zǐ），則（zé）認為睾丸完（wán）全成熟。

促黃（huáng）體激素（LH）、促卵（luǎn）泡素（FSH）、睾（gāo）酮或抑製素B等激素的單次測量不是性成熟的可靠生物標（biāo）誌物。因為激素的分（fèn）泌敏感性高，半衰期短，因此自（zì）體不同時期和個（gè）體間（jiān）變異性較大，不過睾酮水平高於20nmol/L通常可反映食蟹（xiè）猴的性成熟。

貳、雌性食蟹猴的性成（chéng）熟

雌性食蟹猴性成熟最（zuì）常見於至少4歲、體重至少（shǎo）2.5公斤的動物，但（dàn）與雄性一樣，存在（zài）一些（xiē）不確定性。確認雌性食蟹猴性（xìng）成熟最可靠的方法（fǎ）是（shì）通過評估月經出血（xuè）。食蟹（xiè）猴卵巢周期（月經周期）的整個持續時間為30（+5）天，月經出血（xuè）發生時間為1-8 天，平均4（+1）天。但當單獨飼養時，隻有約（yuē）50%的動（dòng）物表現出規則的月經周（zhōu）期。而當合籠飼（sì）養時，高（gāo）達（dá）80%的動物可出現規律（lǜ）的月經周期。值得注（zhù）意的是（shì），雌性（xìng）食（shí）蟹（xiè）猴在一起圈養時，月經（jīng）周期並不會同步。

雌性月經可以通過每天采集陰道拭子來監測，當監測到2天（tiān）及以上出血，並且（qiě）至少間（jiān）隔20天後能夠再（zài）次監測到出血時（shí），說明動物達到性成熟（shú）水（shuǐ）平。由於動物出血時間可（kě）能較短，因此建議（yì）堅持每天采集陰道拭子，而不（bú）是間隔2-3天采集，不然很容易錯過月經期。而評估會陰部皮膚腫脹和皮膚發紅並不是監測月經周期性（xìng）的可靠指標（biāo）。原則上，也可以通過測量血清中黃（huáng）體酮、17-B-雌二醇、LH 和 FSH的濃度來監測卵巢活動周期，但是需要（yào）頻（pín）繁采血。因此，不建議僅通過激素分析的方式評估性成熟程度。

由此可見，評判食蟹猴是否性成熟是一個綜合的指標評價（jià），不可僅靠單一的現（xiàn）象或因素來決（jué）定，使用這樣的方法更科學，從而才能使（shǐ）非臨（lín）床（chuáng）安全評價獲（huò）得的結果更可靠，更有價值。

參考文獻（xiàn）：

Mecklenburg, Lars., C. M. Luetiens, and G. F. Weinbauer.Toxicologic Pathology Forum*： Opinion on Sexual Maturity and Fertility Assessment in Long-tailed Macaques (Macaca fascicularis) in Nonclinical Safety Studies[J].Toxicologic pathology, 2019, 47(4):444-460.